酶诱导

研肉类的代谢特价时,建议将酶诱导研研纳入中,以突出在,即当药物诱导或酶达时,达到当时给的有罪血浆血浆浓度浓度浓度浓度浓度。活性活性产物全身全身增引起的毒性。

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FDA和EMA推荐的研究

细胞毒性和稳定性

CYP mRNA和酶诱导

CYP酶(通讯为CYP1A2,CYP2B6和CYP3A4的诱导)是在人们肝细胞单层培养物中含有的。

CYP1A2,CYP1A2,CYP2B6和CYP3A4,CYP2B6和CYP3A4。的阳台对照对照诱导剂诱导剂所所的作用行。户外,在安全研究所中间行体给药,可以将体动物肝脏(通力是小鼠,大鼠,狗或狗或子)加工成亚细胞细胞分,并用于于评估含量介导的含有。

酶诱导研研监管注意事项

FDA和EMA药物间隔作用(DDI)准则准则建议先开启这些以CYP1A2,CYP1A2,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19和CYP3A4的细胞色素P450诱导,然后然后进行首首应用手人体的试验

诱导资源用词确定临床ddi研临床和范围。

方法

  • 测试系统:冷冻保存的妇女人类繁体肝细胞
  • CYP1A2,CYP2B6,CYP2C8,CYP2C9,CYP2C19,CYP3A4 / 5。
  • 受制品浓度:选择以预测临床暴露(0.1 - 10x C.最大限度),除非受溶解度限制。选择5种浓度于细胞毒性毒性毒性毒性ー诱导诱导研研研研研研诱导研研研诱导诱导诱导研研研诱导研
  • 第72小时,每24小时一左均基。

细胞毒性

在37°C温度,在37°C温度,5%co2条件下,在37°C的中,在37°C温度中,在现场(5种浓度)或阳性对照他莫昔芬(50.µM)的培养孔(一式三份)中培养72小时,每隔24小时更换一次培养基±受试品或对照物。72小时后,将使用MTS测定法评估肝细胞的活力。结果将用于确定诱导检测方法的无毒受试品浓度。

稳定性

结合细胞毒性,采集培养基本本以评估随变变变含量浓度。

CYP mRNA诱导

外来自三种繁体的人在加入的培养箱中,在37°C温度,5%co2条件下,在现在在或不在的地方(七七浓度)或或诱导剂(见下文)的培养孔(一定三份)中培养72小时,每隔24小时更换次基±oighs of ogsals.72小时,提取mRNA,并通话,并并通达时分PCR确定基于Cyp MRNA的水平相对于相对于对照基因(例如GAPDH)的水平进进化。CYP基因达达的含量计算CYP基因达达的分数。相对于相对于空白对照受受.依赖性cyp mRNA水平加加≥2倍,或阳性对照反应的≥20%可为阳光结果。

CYP酶诱导

外来三个繁体的肝细胞在加入的培养箱中,在37°C温度,5%co2条件下,在现在的或不到的东西(三个种)的培养孔(一定三份)中培养72小时,每隔24小时24小时更换±±受受品或或物.72小时后,将肝细胞在没有适当cyp obers(见下文)的新鲜培养基中培养2小时,此后此后反应,并收集样本,使用液相 - 使用方法(lc-ms)进产代谢代谢代谢产物分类倍,或阳性对照的≥20%可解释为阳道结果。

酶活性测定

CYP酶

诱导剂

非诱导剂

分类物

CYP1A2

奥美拉唑

氟马西尼

非那西丁

乙酰乙酰基酚

CYP2B6.

苯巴比妥

氟马西尼

安全他酮

羟基安非他酮

CYP3A4 / 5.

利福平

氟马西尼

咪达唑仑

1'-羟基咪达唑仑

交付成果

这些检测方法将确定与已知已知的cyp酶诱导剂相比的mrna和酶活性水平。如果如果用,也将确定ec50.和E.最大限度

在评估评估临床试验时, 如果观察到阳结果,则或能提供其他指导。

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