免疫组织化学（IHC）是一种联合组织学和免疫学的生物学作用的检测方法。抗体和抗原之间的生化相互作用可支持对抗体-抗原相互作用的分布和定位进行视觉识别。这可确定形态、抗原强度和空间关系。
科文斯可在现场提供高质量的IHC检测方法，从而高效省时地提供定量和定性数据。利用我们内部的IHC服务，可以快速生成数据，从而揭示以下内容：
- 您的化合物对于目标组织的功效
- 组织内的生物标记物位置
- 肿瘤转移机率
- 组织转化为肿瘤的机率
- 肿瘤组织起源
- 研究动物的预后
免疫组织化学的步骤
IHC结果是通过一系列样本制备获得的，此类样本制备可对组织进行操作以发现抗原。组织被手术切除并置入NBF或PFA等固定剂中。在固定过程中，组织会发生化学反应，其中核酸和胺形成由亚甲基桥组成的半可逆交联键（图1）。交联键可建立细胞和组织的稳定性，并保护组织免受蛋白水解酶的分解和破坏。然后可以将固定的组织存储在石蜡中，以便将来随时将其用于IHC。
固定的样本必须经过抗原修复才能检测抗原。切片并固定在载玻片上后，组织必须进行再水化以实现抗体-抗原决定簇相互作用。最常见的抗原决定簇修复方法是热诱导抗原修复法（HIER），该方法综合利用温度、pH和时间以温和地去除交联桥并暴露相应的抗原。
暴露抗原以进行研究之后，将遵循以下一般步骤（图2）：
- 阻断- 不是目标蛋白质和内源性过氧化物酶的蛋白质上的反应位点会产生假阳性信号。为避免这种情况，将采用多个阻断步骤以避免非特异性结合。
- 检测 - 通过荧光或显色手段实现抗体介导的检测。直接荧光检测（图3）涉及与荧光团偶联的一抗的使用。为了检测未充分表达的抗原，间接荧光检测（图3）通过使用荧光团偶联的二抗来放大信号。借助酶偶联的二抗和在组织上形成有色沉淀物的底物可以检测色原。
- 复染剂 - 这种化学染色剂可用来帮助识别细胞特征（例如用苏木精和DAPI识别细胞核），并在抗体阳性染色和普通细胞器染色之间形成对比。
- 成像 - 显微镜用于抗原的数据比较、定性分析和基本可视化。科文斯利用Aperio VERSA扫描仪来更详细、更精细地检测极低水平表达的抗原（图4）。
在研究与药物筛选领域，IHC已被证明是一种重要的检测方法。我们掌握了最有价值的最新技术、检测和分析，能够最好地满足您的需求。如果您想进一步了解我们如何通过免疫组织化学为您的研究提供支持，请联系我们，探讨最佳方案。
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*插图来源：https://www.nationaldiagnostics.com/histology/article/aldehyde-fixatives
**插图来源：http://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/an-animated-guide-to-immunohistochemistry/
