使用细胞细胞子/细胞毒性测试套组通讯流式术术行肿瘤浸润淋巴细胞功能功能分享

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促炎性细胞细胞子反应与颗粒酶与b和cd107a（灯-1）的表达相料合物是免疫肿瘤学领域中的重要生物^1-3。基于细胞的检测方法可以这些靶标在肿瘤来到来源的效应淋巴细胞中的表达行流量化，从而为候选料的使用机械。科文斯的临床前学小组了了肿瘤种新闻方法，该方法利用细胞细胞子/细胞毒性标准标准细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞细胞流式流式流式细胞细胞细胞对，自我杀伤（nk）和自然杀伤t细胞（nkt）亚洲中的这些这些进行。本技术聚焦将细胞因子/细胞毒性™测试测试套组合体育研究中，并融合常规免疫表型分类，帮助在临床前药物批发过程中建立可以的数码集。

包括IFNγ，TNFα和IL-2在细胞细胞子通话促进环境中间天气和适应性适应性细胞细胞细胞活以及细胞而细胞细胞活以及t细胞增殖而细胞活活以及。通过过而或间机构机械以t细胞活或间机构制以the of evenings obermlie的体育治疗方法通讯会加加肿瘤浸润t细胞的频率，这些细胞被转变为主态以强烈繁体刺激。已证实nk和nkt细胞在批发态和后续的二射/tnfα产物方面发育了。体育治疗还可以诱导淋巴细胞获得增强的细胞毒性，从而通过直接的细胞间机械使肿瘤细胞裂解。该流程细胞裂解。。这些毒素会破坏细胞膜诱导诱导细胞凋亡凋亡靶肿瘤靶肿瘤细胞效应细胞的CD107a表达相吻细胞的CD107a表达综合，因此可用用作细胞的含有。

综合来说，可剖析上游特点以环境环境中淋巴细胞群的活活状态的环境环境的状态套组过过过过毒性使使使使使使使使使使使使使使使使使表型表型异性细胞细胞表型表型表型异性细胞表面表面免疫分享与细胞因子和颗粒酶b表达的细胞染色来传播这些

表1：细胞细胞子/细胞毒性测试套组

放射和抗mctla-4治疗后4t1-luc肿瘤衍生效应细胞中细胞细胞子和颗粒酶b的分类

使用小腿4T1-Luc乳腺癌模型在该数集中间说明了细胞子/细胞毒性套组细胞细胞子和颗粒酶测试套组细胞子和b的使用。图1是用来于描绘描绘和nk any的设门策略。与我们没有的临床细胞肿瘤流式术细胞套组一道，分裂的的起点别为排除和死细胞和随后对cd45⁺免疫细胞进行描绘，以鉴定目标免疫亚洲（未未）。在PPMA /离子霉素刺激，IFNγ，TNFα，IL-2和颗粒酶B表达的代表图娃图所。

4t1-luc肿瘤微环境ーーans具有高度的免疫抑制作用，其特征是在大量的粒细胞髓样来源的抑制细胞细胞（未未）.4t1-luc是已知抑制疗法有象的。Ise，与小型动物放射放射台任何体育治疗条件下，流式细胞细胞均未肿瘤中t细胞或nk细胞细胞数量加入，因此肿瘤生长抑制可口不可能由于由于诱导的效应细胞细胞增所所（图2a，右）。然而，pma /离子霉素对肿瘤来到的繁体刺激显示，cd8⁺T细胞具备更高的产力IFNγ的势力。另外，与与相比，NK细胞的颗粒酶B表达水平高（图2b）。这些数目表明，放射和抗mctla-4结合治疗增强了cD8⁺t细胞和别的活的活气。这这明了在针对针对和免疫表型的研中间机械杂志的价值。

图2：对4T1-LUC模型中间效应细胞细胞反应反应反应反应反应反应反应反应反应反应肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤（n = 6 /组）的balb / c小鼠给予抗mctla-4（克里9d9），局灶辐射（“rad”; sarrp，xstrahl Inc.），两两者合成或种型抗对照对照抗对照对照抗抗抗对照。对于细胞因子和颗粒酶b分类，在现在的布鲁德菌素a的情况下，用pma /离子霉素刺激刺激生物5小时。培养后，收集细胞并进免疫染色以细胞内靶标。在Attune™NXT（Thermofisher Scientific）流式细胞细胞上采集数码，然后然后用水杂志软件（BD）进行分享。

抗mCTLA-4治疗后CT26肿瘤衍生效应细胞中的脱颗粒分析

CD107a在脱颗粒过程中在细胞表面表达,并且是通常用于测量治疗诱导的细胞毒活性影响的标记物。细胞因子/细胞毒性测试套组用于检查抗mCTLA-4对小鼠CT26大肠癌模型中淋巴细胞的细胞毒性和肿瘤生长的影响。用抗mCTLA-4治疗的CT26荷瘤小鼠产生了74%的肿瘤生长抑制反应(图3)。为研究细胞毒性,在用PMA /离子霉素对肿瘤衍生细胞进行繁体刺激刺激，测载了CD8⁺T细胞,NK和NKT细胞中CD107a和颗粒酶B的表达。代表表达图谱如图3 b所示。分析表明,与同型对照治疗的动物相比,抗mCTLA-4治疗触发了所有三个亚群中CD107a表达的增加。这与NK和NKT细胞中颗粒酶B表达水平的降低相吻合。数据表明,在脱颗粒过程中,NK和NKT细胞中储存的颗粒酶B被耗尽。请注意,CD8⁺t细胞颗粒酶b的毛达在两组之间没有差异，这可以是治疗和脱颗粒率发射的颗粒酶b再次表达平面所致。复合来看，该表型与治疗诱导的细胞毒性和

图3：CT26模型中的细胞细胞分类。向向已成CT26肿瘤（n = 10 /组）的BALB / C小鼠给予抗MPD-1（克隆rmp1-14）或或种型对照体。进行血型刺激和免疫表型。

定制 - 配置配置测试套组套组以定制细胞子反应

细胞因子/细胞毒性测试套组已经过预先配置以测量促炎性细胞因子。该测试套组也可以定制以检测其他细胞因子反应。例如,辅助性CD4细胞⁺t细胞分泌为不合适的CD4⁺效应子表型，其中包括th1，th2和th17。这些亚洲在肿瘤发布机构方法中有没有的作用.th1细胞的特殊的使用.th1〗的特征在释放的形式，而th2和th17的特征在产后IL-4和IL-17。细胞细胞子/细胞细胞测试套组可传球定制纳入纳入纳入纳入以以in in il-4和Il-17a，从而促进对肿瘤微环境中间辅助细胞从而促进

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参考资料

2. Miller，J. S.和Lanier，L.L.（2019）。癌症免疫治疗中的自我杀伤细胞。《癌症生物学年度回顾》那3.77-103。