代谢稳定性

• 试验系统:汇集的低温保存肝细胞、肝微粒体或血浆
• 测试物种:老鼠,鼠,狗,兔子,minipig,猴子和人类的;按要求增加的品种
• 试验物品浓度:在三次试验中，每品种试验两次(1和10次)

肝细胞的代谢稳定性年代

试验品在大约1×10的两种浓度下孵育<年代up>6肝细胞/mL在William 's Medium E中悬浮5个时间点，添加有机溶剂后停止。

在孵育培养基中进行对照孵育，以确定试验品在孵育条件下的稳定性。使用7-乙氧基香豆素或其他合适的标记物评估每个肝细胞lot的代谢完整性。

微粒体的代谢稳定性

在NADPH存在下，以两种浓度的微粒体(0.5 mg/ml蛋白质)孵育试验品5个时间点，并通过添加有机溶剂停止。在没有NADPH的情况下进行控制孵化，以确定在孵化条件下测试物品的稳定性。

使用7-乙氧基香豆素或其他合适的标记物对每个微生物lot的1期酶进行代谢完整性评估。

血浆代谢稳定性

试验品在血浆中以两种浓度孵育5个时间点，并通过添加有机溶剂停止。阳性对照培养包括普鲁卡因(由羧酸酯酶水解)或其他合适的代谢标志物。

样品分析

使用液相色谱-质谱(LC-MS)分析方法对培养样品进行剩余的试验品分析。然后与初始浓度比较，确定样品中剩余试验品的百分比。经批准后，所选样品可通过LC-MS进一步分析以表征或鉴别代谢物。