单克隆抗体生产

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杂种细胞生成

b细胞克隆

抗体的纯化与鉴定

与多克隆抗体不同,单克隆抗体是针对抗原上的单个表位的特异性抗体,多克隆抗体是针对抗原的多个表位的抗体的混合物。单克隆抗体的这种特异性使研究人员能够探测到那个表位,即使这个表位的变化很微妙——有时小到一个氨基酸的变化。单克隆抗体的一个主要优势是,由于它们是由杂交瘤或重组细胞系产生的,因此可以无限供应具有相同特异性和结构的这些抗体。

Labcorp利用两种不同的技术来产生单克隆抗体:杂交瘤和b细胞克隆。对于杂交瘤技术,用抗原免疫啮齿动物,当检测到足够的免疫反应时,抗体产生细胞与骨髓瘤细胞系融合并筛选。另外,在b细胞克隆中,筛选免疫动物的脾细胞,从选择的b细胞中克隆和表达重链和轻链基因。这两种技术都提供了产生几乎无限供应的具有相同特性的抗体的机会。

杂种细胞生成

  • 啮齿动物宿主种类
  • 用于融合的脾细胞和/或淋巴结
  • 各种融合程序,如聚乙二醇(PEG)或电融合

b细胞克隆

  • 几乎所有寄主物种
  • 抗原特异性b细胞分离法
  • 重链和轻链基因的克隆
  • 哺乳动物载体的表达和稳定的细胞生成

抗体的纯化与鉴定

  • 扩大:
    • 腹水或在体外方法
    • 支原体检测,同型
  • 杂交瘤细胞系的细胞库/存储
  • 哺乳动物载体的瞬时转染

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