タンパク结合

方法

• 血浆血浆综合性法
  • 试験システム：各种または特定のタンパク溶液からのプール（ヒト血清アルブミン，α₁- 酸性糖タンパク质，γグロブリングロブリン）
  • 浓度は，溶解度で制でさない限制，既知既知临床曝露（0.1 - 10x C.）_最大限度）を一般するように选択れれれます。

  平台透析

  平均透析は，ハイスループット透析装配（htdialysis llc，コネチカット州ゲールズフェリーフェリーれますダルベッコリン酸缓実施実施さますますダルベッコの酸缓実施されます。た基因（血浆または分类血浆タンパク质）をドナーチャンバーに添します。次次，プレートをガス透过性ので密封，指定密封，5％co₂で37°Cで培养します（以下を参照）。培养培养，各チャンバーからのサンプルは体クロマトグラフィー料分类法（LC-MS）をを使ててててれれれれれれれれれれれれれれれますますれれ

  • 基本の安性：被験物质を血浆およびdpbs内で，最大5つの时尚まで単一致培养します。
  • 平坦化学までの时间：被験物质をを血浆血浆に単で加入，dpbsに対して最大5つの时钟で透析します。
  • タンパク结合浓度依存性：被験物质を血浆に3つの浓度で添加し，平台に必要ななだけdpbsに対して透析します。
  • ワルファリンなどの阳性対照，同时平静透析で5时间以上テストされ。

  资料

  强化され血浆は，分析分子量が30,000 daのバーバーににさますますますますます。サンプルサンプル37°C，2,000×gで（または他の适切なで）15次间远心分类ます心鱼分类后，无限期过液を被験に対してに対して浓度とししに対してをますます。

  • 非特异的综合：対照血浆资料过液（puf）に2种类の浓度で被験质添の手顺にててをします従ってをのし。がない结合のー潜な非ー异ますししします。
  • 试験物联浓度依存性：试験物质を5种类のので血浆添加し，房限定过のにて心分享到しに従って远远物。

  超远心分泌法

  37ºC，223,000×で（または他の适切なで）4时，323,000×で（または他の离血浆て，血浆タンパク质から血浆心脏分享，血浆血浆质血浆ます，を心分别远心分类をLC-MSで分类してて浓度浓度比较し。

  • 非特兰的综合：対照ヒト血浆と対照에过液（puf）に2に2种类の浓度で物质を添し，超远心管4时间培养しし。基于ますをして，血浆の非下での被験物质の回收およびー潜ー潜ーおよびー异ますしし。
  • 被験物质を5种类のの浓度血浆てて心分析，超远心分享到ますに心脏分类し。
• 血液空间分析方法

  BPP杂志は，ヒトを含むさまざまな种血液中の被験物の在体外血液空间分享到をするするに使使ます。

  • 试験システム
  • プールされ动物ののサンプルと々のヒト血液に対して，ヘマトクリット値が判定されます。
  • 血液は2〜8°Cででされ，受领受领1空间以内にできるだけ早く使使れます。

  被験物质を血液血液添，最初最初のアリコートを采取ししに従っ従ってて血液をを従っ従ってててで培养ししに従っ従って従ってしし従っ従っし従っ析れためしし除去ししししますしししししししししししししししししししししししししししししししますしししししししししししししししししししししししし従っ従っ従っ従っし従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ添従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従って従っ添添添て従っててて添添添添添添添添添添添添添添添被験被験被験被験添被験添被験被験被験被験添添添被験添添添添添添被験被験被験添添被験被験被験被験被験质被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ従っ添添被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験被験恐精会て血浆を采取ます。アリコートを分类のためにし，最初のアリコートと比较します。

  • 基本の安性：被験物质を中中において単一浓度最大大4时尚で培养します。
  • 平坦化学までの空间：被験物质をを血液血液に単浓度で大4时尚まで添加します。
  • タンパク料合并浓度：试験物质を最大5种类の浓度で血液に添，平台时代まで培养し。

  放射性放射性化されたた物のの含量，体内シンチレーション（LSC）ののに，血液のアリコートアリコート可化しし放射性のてないないし。（LC-MS）により分类する前に，血液のアリコートを溶解し。

• ミクロソームミクロソーム综合性法

  被験物质が体外でヒト肝臓ミクロソームタンパク质にする可性评価するで，こうこうたををたにおける未未をの补が未にのの正式

  平均透析は，ハイスループット透析装配（Htdialysis llc，コネチカット州ゲールズフェリー）ををして三重にされれ各ウェルウェルのレシーバーチャンバー添ししながらながらながらながらさささささささたれれされ添します。次次，プレートをガス透过性膜で密封し，5时，5％CO₂において37°Cででします。培养培养，各チャンバーチャンバーのサンプル液クロマトグラフィー载分类法（LC-MS）を使使てしててれれれれ。

  • タンパクタンパク合：ヒトヒト肝臓ミクロソームがリン酸缓冲液でででの（0.05,0.1,0.5 mg / ml）に希釈されます。次次，被験物质を3种类の浓度でにに添添，サンプルが计9つとなるようにします强强さた基于は，三重でhtdドナーチャンバーにれ，リン酸塩に対して5时间透析され。
  • ミクロソームでの安定性：前述の强化された基因サンプルを，5％co₂において37°C≠0时间と5时间それぞれ培养します。