Cytokine / Cytotoxicity™パネルを用词たフローメトリーによる，肿疡浸润リンパ球の机械分类

详细については，前临床オンコロジー科学チームまでお问い合成ください。

グランザイムB，CD107a（灯泡-1）の発现と组みわせた炎症炎症性サイト反応は，免疫肿瘤间空间における価値バイオマーカーと言えます^1-3。肿疡肿疡生物のエフェクターリン球において，このような标的のの発现定はできるベースアッセイは，候补薬はしますの洞察をします。，t细胞，ナチュラルキラー（nk）またナチュラルキラーt细胞サブセットででのエンドのの标准，サイトカインまたは毒性の标准フローサイトスポットを提供します。パネルがどのように体内研にされ得るか，そして前临床の医薬品牌开放，従来の免疫表现型组みわせたたデータどのするよう助け强固なるかをて助けなるいいいい

IFNγ，TNFα，またIL-2を含むカインは肿疡微は环境においての，またまた适応済みの免疫细胞活性活性とと细胞の増殖抗肿疡抗肿疡促进ししししししますししますますますしますますますししますますししししししますしししししししししししししますますますしししししますししししししししししし。活性化解ことで肿疡肿疡成长をする体内疗法は，离体ます。サイトサイト生成に加油，体内疗法はパ球に大大し毒性をすることがあり，细胞同士の直接による肿疡细胞过ははにしこのは，免疫细胞内蓄积され细胞颗粒から，パーフォリン，结果として细胞毒性活性マーカーとしてとして使としてことことががにになりなりなり能なりなりなりなり

上帝に描写れれいる识别特价は，合适と肿疡微小环境内のリンパ球サブセット活性状态をするおよびにになりますはサイトおよびおよび毒性パネル，t细胞，nk，nk，nkthings of theals。抗体をを使った细胞表面免疫型検查とと発现カインおよびb発现発现细胞内染色ををを能能可にし（図表1）。

図表1：细胞因子/细胞毒素™パネル

放射线治疗および抗mctla-4治疗后のサイトカイングランザイムb 4t1-luc肿疡派生エフェクター细胞の解析

サイトカインまたは细胞毒性パネルのの，サイトカインおよびグランザイムb测定のは，このマウス4t1-luc乳癌モデルを使たデータセット示さてますます図表示さています図表図表れいとます细胞细胞サブ轮郭をを描くのににサブの轮郭を描くのににティング戦略ををてます。他のすべての前临床オンコロジーサイトメトリパネルパネルも言える言えるがが，解析ははの户外から，続いて対象のサブセットサブセットをためののcD45⁺免疫细胞の描写に続き続き（表示表示）。ここここは，pmaまたはイオノマイシン刺激のifny，tnfa，il-2そしてグランザイムb発现の代表的なプロフィールを示します示し示し示し示し示し示し示し

4t1-luc肿疡の微微微ははは非常はに免疫免疫ーーーーーでで球性骨髄抑制细胞によって性付けられ（表示表示）.4t1-lucはチェックポイント阻害に耐性のあるとしてとしてられられいます。しかしながら，小动物绕线研究プラットフォーム（sarrp，xstrahl）をを介し放射线疗法とすると，抗mctla-4は4t1-luc肿疡の阻害阻害改善がれまし（図表2a，左侧）。肿疡の増殖阻害は，アイソタイプコントロールグループと比べての体内治疗环境后にも，フローサイトメトリが肿疡内に细胞nk细胞细胞体数数量加加を表しいない（2a，右侧）こと，治疗によるエフェクター细胞リクルートリクルートから效果ではないとリクルートます。しかし，pmaまたはイオノマイシンによる肿疡生先生细胞离体刺激は，cd8⁺t细胞にifnyを生成するされたたが备がいることががにています。加入ています，nk细胞はより高度レベルグランザイムのデータ示しいい。と抗mctla-4のの用治疗がcd 8⁺t细胞とnk细胞のの活性ををををことことをを示唆ていますますいますいをを追求するするする研研する械械をマーカーをを含める含める意义を示してい含めること意义を示してい

2：4T1-LUCモデル，エフェクターエフェクター细胞内の炎症诱発性性。确立した4T1-LUC肿疡肿疡を（n = 6 /组）BALB / Cマウスに，抗MCTLA-4（クローン9D9），焦点焦点线（「rad」Sarrp，Xstrahl Inc.），またはその2つの组み合，あるいはアイソタイプコントロール抗を投与しましたた。肿疡肿疡细胞単离たたました。肿疡は细胞単离（gentlemacs™，miltenyi biotec）に分类され，データ收集の前にに光性抗によってによってさされ。サイトサイトカインおよびb解析解析のためににためためににブレフェルジンブレフェルジンブレフェルジンブレフェルジンがででででででででイオノマイシンイオノマイシンによってによって细胞されましまし细胞细胞さ培养されたた后ははさされたたされれ标标标染色ささまし​​た。データデータiteune™nxt（Thermofisher scientific社）のフローサイトメーターによって收集れ，その后flowjoソフトウェア（bd社）をを用して解析されましまし。

抗mctla-4治疗后后のののの颗粒の解析

CD107Aはは脱颗粒颗粒反応に细胞表面に発现，细胞细胞毒性活性の治疗诱导效果を测定するのによくよくよく测定するのよくよくいマーカーとなってい.Cytokine/ Cytotoxicity™パネルはリンパ球细胞における抗は球球における抗MCTLA-4の影响，またまたct26结肠直肠癌モデルのの増殖をためにににられました抗mctla-4で治疗をたct26担癌マウスをたたのの増殖阻害をましまし（図表3a）。细胞毒性を検证するために，pmaまたはイオノマイシンの现处下で肿疡生物细胞の离体刺激刺激をした，CD8⁺t细胞，nk，nkt细胞内のcd107aおよびグランザイムb発现発现が测定されましましいるいる代表的発现発现プロフィール解析解析的的的的発现によるとところところによるとによるとによるとによると，抗mctla-4治疗，治疗済み済み动物と比较した时，3つすべてのサブセットにおいてcd107aの発现の増増が起きていとます同ににとレベルののが起きていデータデータ起きていいデータデータはていいますますさはさががががさされNKT细胞细胞が脱脱颗粒反応のにに减少することを示唆していい.CD8⁺t细胞グランザイムb発现はグループグループ间で相违は无く，そのそのとしては，治疗によってグランザイムb德诺维発现が起き，脱脱颗粒反応ががししことが考えられるられるていういう点に注意しててくださいを鉴みてはくださいて表现表现型ははて表现表现型ははする细胞杀伤型は直接连毒性杀伤型は直接直接毒性と型效能直接とと效能效能の经

図表3：CT26モデル内の细胞のの解析のたたたたたをを（n = 10 /グループ）BALB / Cマウスマウス抗MPD-1（クローンRMP1-14），またはアイソ··コントロール抗体をを。上游に明明されいるように，exvivo刺激と免疫表现型検查実施した。

个别対応 - 个别対応サイトカイン応答ためためパネル设定

Cytokine / Cytotoxicity™パネルは炎症诱発性カイン测定事前事前されてますいいは他のサイトカインカイン検证するためために个别対応例えばこと能ですです例えば例えば可以です例えばこともです。例えば，ヘルパーcd4⁺T细胞は，th1，th2，th17のような异なっcd4⁺エフェクター表现型に分化されます。これらのサブセットは肿疡病原性において，それぞれ异なった役割を果たします.Th1细胞は的IFNγの放出によって特徴付けられる一方で，Th2细胞および的Th17はそれぞれIL-4とIL-17の生成によって特征付けますられcy。胞嘧啶/ cytotoxicity™パネルはIL-4和IL-17aを含する个别対応が可で，肿疡の小环境におけるヘルパーで细胞のの效果の，机械的解析を円滑に进めることが容易になります。

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参照

2. Miller，J. S.，Lanier，L. L.（2019）。癌症免疫疗法中的天然杀伤细胞。癌症生物学年度审查那3.77-103。