CT26-LUC：联合国Modelo MurinoOrtotópicodeCáncerde Colon：Implicancias Para estudios de Inmuno-oncología

Introduccion

LaAparicióndeTerapiasQue Aprovechan antividad AntitumoralIntríncadelsistemaInmunológico僵局Elcáncer代表Un Cambio de Paradigma en Las Terapiasincológicasquifica que ha modificado para siempre el futuro de los tratamientos contra elcáncer。

El cáncer color直肠(CCR) es uno de los tipos de cáncer más流行y代表10% de todos los casos de cáncer;zh 2018 se observaron más de un millón de nuevos casos de CCR en todo el mundo, con más de medio millón de muertes¹．en Cuanto Al TratamientoClínicose suele recurrir a UnaExtirpaciónquirúrgicaseguida por QuimiotaRapia Adyuvante ParaCáncerde Colon SinMetástasisyTerapiasMásFocalizadaspara ccr conmetástasis²．Algunos EstudiosClínicosrecientesemuestransólidos结果os para lainchicióndepuntosde puntose de puiltiess depacientessconcáncer托拉替特罗斯托·塞斯塔斯（Inaldaber conta Inestabilidad microastelital（IMS-A）o Con LaReparacióndemamejamiento（DMMR）^3.．埃尔beneficioClínico医院FUE TAL阙烯EL夏天之日2020本身aprobóELfármacoKeytruda（未anticuerpo单克隆阙ataca LA蛋白A德PUNTO德inmunitario控制PD-1 Humana公司）como的terapia德西甲拉利内阿第pacientes CON CCR阙cumplen CON estos TRES criterios。⁴．在对CCR进行免疫治疗的新方法中，有必要采用preclínicos的方法对新药物的疗效进行评估。

Para Evaluar La Eficacia de Tratamientos Focalizados en El SistemaInmunológicoSeeEcesitanModelos TumoralesPreclínicosConSistemasInmunológicosintactos介绍Para Hanipular Los Agentes de Prueba。Los Modelos Tumorales MineNeicos Taptan Aste Tipo De Estrategia，Donde SeSmotiancélulasdeCáncer德里卡替纳达德国Formar联合国肿瘤en La Variedad deRatóninMunocompetentedel Origen delascélulas肿瘤。Hemos Usado Salkiamente El CarcoNoma de Colon Murino CT26.wt Como Modelo肿瘤Subcutáneen Ratones Balb / C Hembra para evalear la Eficacia de Agenes de Inmuno-oncología;Lea sobre nuestro trabajo conelmí（Datos Adicionales Disponsibles A律师）。

• Destacado：Carcinoma de Colon Murino CT26
• Póster：caracterizacióndoliferaciónendososjuegos secundarios de linfocitos en En En El Modelo CT26 Murino de Carcinoma de Colon ATravésdeCitometríade Flujo Multicolor
• Póster：análisisde Inmunofenotipos y经骨折omas de los modelos tumorales murinos ct26 y 4t1 luego del tratamiento con anti-ctla-4

Reporcemos Las Limitaliones实验y Traslacionales de Los Modelos TumoralesSubcutáneos：宫内节育器肿瘤肿瘤Diferente Comparato Conlo Que SurgendelórganodeOrimencomo，entre Otros，PerfilesdeCélulasInmunesQue Pueden Afectar La Respuesta A La InmunotaRapia^5、6．LaImplantacióndecélulasducoralesen En El Tejido de Origen，Lo Que Se Conoce Como Implante TumoralOrtotópico，Busca Rectificar Las Limitaliones de losstudiossubcutáneosy aliumentar la Posible Compuidad traslacional del modelo。

en EsteArtículodemodelo destacado theneamos datos que demuestran联合国Modelo tumoral murinoortotópicousando联合国癌De ColonCt26.wtymétodosQuirúrgicos忏悔者Para laImplantaciónyvalidandola Respuesta a la inaligando la Respuesta a lainalidióndepuntosde控制。

Todo El Trabajo en AnimalesContóCON4AprobaciónDelComitéIstitucionalde Uso Y Cuidado Animent Del Centro Y SERealizóAlformeaLaGuía帕拉·塞纳里多斯·雅列索（Animales De Laberatorio Dentro de）Acreditado Por La Aaalac Con Criterios de Eutanasiaumanitaria predeterminadosTodos Los estudios。

CrecimientoOrtotópicode肿瘤ct26.wt-luc

Para poder evaluate longitude inalmente progresión tumoral en ubicación ortotópica, se transfectaron establemente células de colon murino CT26。在生物发光(BLI)中，我们可以观察到生物发光的侵袭性。接种subcutáneamente ratones Balb/c不与células CT26进行贸易。WT的结果为肿瘤subcutáneos的确定。我们的研究成果如下:subcutáneos肿瘤外切、碎片切除、肠内注射、肿瘤外切、肿瘤内注射、Fiegle等。⁷Seevaluóel crecimiento tumoral en los标准仪mediante bli dos veces por semana durante cuatro semanas para consurear longitudinalee el crecimiento tumoral（Imagen 1）Partas de los tresdíasdel植入肿瘤瘤。SE Registraron Los Pesos Distrales，ImageCionesClínicas依亚斯yimemenciones durante la尸体宫终端。

Figura 1.Cinéticade crecimiento de tumores erivados de ct26.wt-luc ImplantadosOrtotópicamenteen Ratones Balb / c

LaProgresióndaCarga肿瘤Fue Robusta YMínimamente变量。Elíndicede prendimiento肿瘤fue del 95％basado en la bli y尸体虫，y no se neativalaronregesionesespontáneas。El Tiempo deDuplicación（TD）De Volumen del Tumor DerivadoSegúnLaBliFue de 1,5Díasy el Tiempo Promedio en estudio fue de 21días。

LasDeampencionesClínicascomunes asociadas a laEvolucióndelainfermedadfuerondistensión腹部Por El Crecimiento tumoral yaumento de Peso deveral（los datos no se muestran）。La NecropsiaReveló兰花Masas Primarias en El Intestino Ciego YPequeñosNódulosen ElHígadoy削减腹部。Los肿瘤Primarios en En El Colon LeekerAl Una GranOttentación血管Con El Colon，Lo que indipa联合国Reglutamiento血管效率por parte del肿瘤。Nuestro Siguiente Enfoque Fue Usar Este Modelo Para Modemar La Eficacia de Agentes de Inmuno-oncología。

抑制抑制ZHEL MODEMO肿瘤CT26.WT-LUC ORTOTO-PICO

SERealizó联合国植入Quirúrgicode fragmentos del肿瘤Ct26.wt-luc en Ratones Balb / c Sin tratar Tal Como描述iNeriormente。Los Animales SE Ingengaron Por Bli TresDíasPlocuésdelsiCirugísySedistribueron en grupos de tratamientosegúnlosvalores de la bli。Los Animales SE Trataron ConAssistración腹膜内易10 mg / kg控制De Isotipo（克隆LTF-2），抗MPD-L1（克隆10F.9G2），抗MCTLA-4（CLON 9D9）O抗MPD-1（Clon RMP1-14）DOS Veces Por Semana Durante Dos Semanas。Todos Los Iteruerpos Se Adquirieron de Bioxcell（黎巴嫩，埃杜汉普郡，ee。uu。）。SEmonitoreó洛杉矶veces por emana por bli por bli para medir la carga肿瘤，tres veces por semana para reglarrar eL peso comparal y se hicieron neamimacionesclínicasdiairias y deamipmaciones en la尸体症终端。

La administración del antiuerpo de control no tuvo ningún efecto en La carga tumorni La evolución de La enfermedad (imagen 2A, 2B)。我们的时间empo de duplicación肿瘤在动物中，我们的时间是administró同位素fue de 2,2 días，我们的时间empo promedio en estudio fue de 28 días。结果:administración de anti-mPD-L1 (imagen 2A, 2C) fue una regresión complete (carga tumor no detection por encima de los valores de BLI)。图2A, 2D，反mctla -4(图2A, 2D)，输入ΔT/ΔC，输入0.1%，输入día 23，输入部分回归(输入BLI menos，输入mirad，输入día，输入tratamiento)，在尸检中可见。La administración de anti-mPD-1(图像2A, 2E)在肿瘤中无明显逆转。

画像3。Imagenología肿瘤的生物发光现象ortotópico CT26。WT-luc a la inhibición de puntos de control

La Carga Tumoral SELocalizóNELABDOMEN YHumentóCONELCERERDEMPO（IMGEN 3）TAL COMO SE ESPERABA BASADO EN EXPERIMISTOS de Crecimiento Piloto Anterior（Los Datos No Se Muestran）。EL结果达德尔特拉伐斯托康省反MCTLA-4 FUE REDRESO en LaAparicióndeAumentodePesoRelacionada Con La Enfermedad（Los Datos No Se Muestran）。Con LaAsspertacióndeAtri-MPD-L1 o防MCTLA-4 SE EVAING- UN陈旧en EN ENTERICIO deiepientiva devida Sobre EL控制de Isotopo de 12,5 y 23,6Días尊重。La Necropsia Terminal NoRevelóNingunaEvidencia de肿瘤U Otras Lesiones en 1 de Cada 8 Animales TrataDos Con Anti-MPD-L1 Y 5 de Cada 8 Animales TrataDos Con Anti-MCTLA-4。

Seguimos Trabajando en LaEvaluacióndeLasDiferencias Entre Ubicaciones de Implante CT26.WtSubcutáneyortotópicoConeyOrtotópicoConeAconeinfiltradosdecélulasinfuntradosdecélululasantomes，característicashistológicasymorfología，junto conlaactiachióninmunológicaen reshuesta al bloqueo de puntos de控制。

Tomando estos Datos en Conjunto，Hemos Demostrado Que El ModeloOrtotópicoCt26.wt-lucdeCáncerdeColonsirveComo Una PlataForma Robusta Para Evaluar Agentes de Inmuno-oncologíaNenUnaUbicacióndeLanganteAltamene曲线曲线。Póngaseen相关联Con loscietyíficosPara AccederAmásfignaCiónSobreel Ct26.wt-luc，y otros modelos tumoralesortotópicosmurinos，ycómopodemos aplicar estas herramientas para agilizar su estudiosincológicos。

参考文献

¹Bray F等人。“2018年全球癌症统计数据：185个国家的36个癌症全球发病率和死亡率的估计”。CA CANDER J CLIN 2018;68：6,394-424。

²kuipers e等。“结肠直肠癌”。NAT Rev Discers。2015;1：15065。

^3.Tintelnot J，Stein A.“结肠直肠癌的免疫疗法：可用的临床证据，挑战和新方法”。世界J胃肠罗。2019年;25:29,3920-3928。

⁴Administración de Medicamentos y Alimentos。FDA批准MSI-H/dMMR转移性结直肠癌的一线免疫治疗。《通讯》，2020年6月29日。

⁵引用本文:王志伟，等。“不同解剖部位的组织可以塑造和改变肿瘤微环境，从而影响对治疗的反应”。摩尔。2014;22:1, 18-27。

⁶Zhao X，Li L，Starr TK，亚克马兰S.“肿瘤位置会影响结肠癌小鼠模型中的免疫反应”。Oncotarget 2017;8:33,54775-54787。

⁷王志强，王志强，王志强，等。“双CTLA-4和PDL-1阻断剂在高侵袭的原位小鼠结肠癌模型中抑制肿瘤生长和肝转移”。瘤2019;21:9, 932 - 944。

autor：

Patrick Allison，PHD |Científico，desarrollocientífico

Fecha：

Diciembre de 2020.