酶抑制

• 测试系统：汇集的人肝微粒体（HLM）
• CYP酶进行评估：CYP1A2，CYP2A6，CYP2B6，CYP2C8，CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1和CYP3A4 / 5
• UGT酶直接抑制测定根据请求进行评估：UGT1A1，UGT1A3，UGT1A4，UGT11A6，UGT1A9，UGT2B7，UGT2B15
• 检品浓度：8个浓度一式三份
• 所有样品制备和温育都是使用汉密尔顿麦博星自动化液体处理系统中执行

CYP抑制在直接和依赖性测定中测量。甲CYP选择性衬底，在实现最大反应速度的一半基板的浓度（K_米）对于每个CYP酶（见下文）。已知抑制剂被用作用于直接和代谢依赖性抑制试验阳性对照。所有温育都通过加入冷的乙腈终止，含有稳定标记的内代谢物标准比对CYP衬底。

直接抑制

测定在不存在和存在8种浓度的测试物品的存在下进行，以确定潜在的抑制，并在可能限定的IC 50。

直接抑制可以k为进一步的特征在于通过确定抑制常数（_一世）和抑制的类型观察到的，使用5个浓度探针底物。

时间相关的（不可逆）抑制

使用8种浓度的测试物品的测定在不存在和用于稀释之前到30分钟的NADPH存在成探针基底测定混合物孵育。如果观察到显着的时间依赖性抑制，附加动力学参数可以被确定，包括失活常数（k_INACT）和抑制常数（K_一世）。这些参数，通过改变预温育时间和抑制剂浓度实验确定，可以帮助定义的药物 - 药物相互作用的可能性。

交付

这些分析将提供IC₅₀用于直接或不可逆抑制CYP酶的值。如果显著直接抑制中观察到的抑制常数（K_一世）可以被确定。如果显著时间依赖性抑制被观察到的，基于机制的失活参数（K_一世和K_INACT）可以被确定。有了这些参数，定量药理学评估的临床试验，需要时可以允许更多的指导。