造型immuno-oncology in a humanized mouse

作者：

帕特里克·艾莉森，博士

DATE:

2020年2月

免疫缺陷小鼠设计缺乏适应性方面nity which makes them an ideal host for supporting the transplantation and growth of human tumor cells. Preclinical xenograft models utilizing immune deficient mice are limited for the investigation of immunotherapies due to this lack of functional immune cells. This spotlight will highlight a method in which human T-lymphocytes cells can propagate within an immune compromised mouse and support tumor xenograft growth.

NOD-SCIDIL2RγUL（NSG）与人外周血单核细胞（HPBMC）一起使用的小鼠已经在异种移植模型中使用，以评估免疫检查点抑制剂的疗效和药物动力学靶向人T淋巴细胞的表位1。该模型在传统的异种移植物中是独特的，因为功能性人体T细胞可以在小鼠中靶向肿瘤上的人表位，直接可翻译的临床意义。NSG小鼠缺乏树突和巨噬细胞群，并携带两种特定突变，使它们具有高度缺乏淋巴细胞;PKRDC突变禁用DNA修复的方面，使小鼠B-和T细胞缺乏，并且缺失IL2Rγ块NK细胞成熟2。这种缺陷的组合允许HPBMC的植入并允许在NSG小鼠中扩增人T淋巴细胞。

The hPBMC engrafted NSG mouse does have caveats that must be evaluated prior to human donor and tumor model selection. First, administration of human immune cells to a mouse results in T-cell mediated toxicity consistent with Graft Versus Host Disease (GvHD), in which human lymphocytes attack mouse tissues, limiting the therapeutic window3. Second, engraftment efficiency, cell types present, and activity have been observed to be variable between human donor sources4. Finally, we have observed instances of hPBMC rejection of the human tumor xenograft (data not shown). Evaluation of these parameters with the donor source and tumor model of choice, prior to initiating definitive efficacy studies, is critical for the success of translational early development programs.

本研究的目的是评估向携带皮下人肿瘤异种移植物的NSG小鼠的HPBMC的人T淋巴细胞的植入。以AAALAC认可的设施在护理和使用实验室动物的指导中符合动物护理和使用。NSG小鼠（Jackson Laboratories，Bar Harbor Maine，USA，rucation＃000557）携带皮下miapaca-2人胰腺导管腺癌静脉内施用来自四个不同正常健康供体的HPBMC（Hemacare，Los Angeles Ca，USA）。进行肿瘤生长，体重和GVHD样特性的评价。收集全血以进行人淋巴细胞标记物的流式细胞术分析，以确认CD45 +细胞的供体植入，包括CD4 +和CD8 +细胞，在第14,28天和第42天施用时（图1）。

未治疗对照动物的MiaPaCa-2肿瘤倍增时间（Td）为9.1天，每个供者组给予hPBMCs的动物的Td为8.7-11.6天。在植入后30天之后，服用hPBMCs的个体的生长变化被观察到。1000mm前肿瘤生长^三没有受到HPBMC植入的影响（图2）。这些结果表明，所使用的任何捐赠者都适用于评估尺寸（TES）为1000mm的MiaPaCa2疗效研究^三.

通过体重和临床观察监测GvHD症状的发生；虽然在本研究中未经病理证实，但在该模型中观察到的症状与疾病密切相关5。症状包括体重减轻（图3）超过基线的10%，皮毛粗糙，驼背姿势，皮肤损伤和腹泻-出现所有症状或严重程度高的动物被从研究中移除。注射hPBMC后32天，观察各组半数以上动物的临床症状。因GvHD症状而未切除的动物因肿瘤负荷超过2000mm而切除^三，或在学习终止。