免疫组织化学（IHC）是一种利用组织学和免疫学的生物学协作的分析方法。抗体和抗原之间的生化相互作用允许抗体-抗原相互作用的视觉分布和定位。这允许确定形态学、抗原强度和空间关系。
Covance在现场提供高质量的IHC分析，让您能够及时读取定量和定性数据。通过我们的内部IHC服务，可以快速生成显示以下信息的数据：
- 你的化合物在靶组织中的功效
- 生物标记物在组织中的定位
- 肿瘤转移的发病率
- 将组织转化成肿瘤的发生
- 肿瘤组织起源
- 研究中的动物预后
执行免疫组织化学的步骤
通过一系列样品制剂获得IHC结果，允许操纵组织以用于抗原发现。手术移除组织并置于固定剂（如NBF或PFA）中。在固定期间，组织经历一种化学反应，其中核酸和胺形成由亚甲基桥组成的半可逆交叉链路（图1）。交叉链接产生细胞和组织稳定性，并保护组织免受分解和蛋白水解酶的损伤。然后可以将固定组织储存在石蜡中，使其在IHC的任何未来时间使用它们。
已经固定的样品必须经历抗原检索方法以检测抗原。在载玻片上切割和安装后，必须再水化组织以允许抗体表位相互作用。最常见的表位检索方法是热诱导的表位检索（HIER），其利用温度，pH和时间的组合来轻轻地去除交叉桥并暴露感兴趣的抗原。
一旦抗原暴露用于调查，则遵循以下一般步骤（图2）：
- 封锁- 不是感兴趣的蛋白质和内源性过氧化物酶的蛋白质的反应位点可以产生假阳性信号。为了避免这种情况，利用多个阻塞步骤来避免非特异性绑定。
- 检测- 抗体介导的检测通过荧光或色原型方法实现。直接荧光检测（图3）涉及使用与荧光团缀合的一抗体。为了检测未充分表达的抗原，间接荧光检测（图3）通过使用荧光团缀合的二抗来放大信号。用酶 - 缀合的二抗和形成组织上的底物进行色原检测。
- 复染- 这些化学污渍用于帮助鉴定细胞特征（例如具有血管基碱和DAPI的细胞核），以及在阳性抗体染色和一般细胞器染色之间产生对比。
- 成像–显微镜检查用于数据比较、定性分析和抗原的基本可视化。在Covance，我们利用Aperio VERSA扫描仪对低水平表达的抗原进行更详细和精细的检测（图4）。
IHC已被证明是研究和药物发现领域的一种非常宝贵的分析方法。我们不断更新最有价值的技术、检测和分析，以最好地满足您的需求。如果您想了解更多关于我们如何通过免疫组织化学帮助支持您的研究，请联系我们这样我们就可以为您讨论最佳选择。
*插图信用：https://www.nationaldiagnostics.com/histology/article/aldehyde-fixaives
**插图信用：http://www.leicabiosystems.com/pathologyLeaders/an-animated-guide-to-immunohistochemisty/
